Ce kit utilise une technologie d'amplification rapide des acides nucléiques à température ambiante ou à température constante (généralement entre 39 ºC et 42 ºC). La transcriptase inverse utilise des amorces spécifiques et des modèles d'ARN pour synthétiser des brins d'ADNc. La recombinase et les amorces, aidées par des protéines auxiliaires et des protéines de liaison simple brin -, forment un complexe qui recherche et se lie à la région d'homologie cible. Cela aboutit à la formation d'une boucle D-, initiant l'échange de brins. Une fois la recombinase dissociée, la polymérase se lie à l'extrémité 3' de l'amorce et commence l'extension de la chaîne. Grâce à l'action de l'enzyme nfo, une sonde moléculaire spécifique, conçue selon le modèle, est ajoutée et la technologie de l'or colloïdal (méthode sandwich) est utilisée pour détecter le résultat final.
【Caractéristiques】
Haute sensibilité, forte spécificité et temps de réaction court (seulement 15 minutes), et les composants de réaction sont à l'état de poudre sèche, facile à utiliser et à stocker.
Ce réactif nécessite peu d'équipement et l'opération de réaction peut être effectuée dans des bains métalliques, des bains-marie, etc., et il n'est pas nécessaire d'acheter un équipement exclusif coûteux tel que des amplificateurs PCR.
SfortSpécificité
Ce kit offre d'excellentes performances pour une amplification précise des acides nucléiques.
Réaction rapide
La réaction se termine en seulement 15 minutes.
Pratique
Les composants sont sous forme de poudre sèche, ce qui les rend faciles à stocker et à manipuler.
R simplerequis
Convient pour une utilisation avec des équipements de base tels que des bains métalliques ou des bains-marie, sans avoir besoin d'amplificateurs PCR coûteux.
【Conception de l'amorce】
Il est recommandé d'utiliser des amorces d'une longueur de 30 à 35 pb. Des amorces trop courtes affecteront la vitesse d'amplification et la sensibilité de détection ;la fin de 5' duamorce inverseest étiqueté avec un groupe de modification (biotine couramment utilisée).Les amorces sont conçues pour éviter la formation de structures secondaires qui affectent l'amplification ; il est recommandé que la longueur de l'amplicon soit comprise entre 150 et 500 pb.
【Conception de sonde fluorescente】
Concevoir une séquence de sonde de 46 à 52 nt, complémentaire au fragment cible, située entre les amorces amont et inverse.
- Unétiquette antigénique(généralement FAM) est étiqueté à l'extrémité 5'.
- A dSpacer(tétrahydrofurane, THF) est placé au milieu de la sonde (entre les extrémités 5' et 3'), agissant comme site de reconnaissance de l'enzyme nfo.
- Le3' finest marqué avec un groupe de modification, tel qu'un groupe amine, un groupe phosphate ou un C3-Spacer.
【Composition du kit】
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Composition |
Ccontenu |
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ADtampon |
1,6 ml × 1 tube |
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Tampon B |
150μL×1Tube |
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Réactif |
48 T |
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Manuel de guidage |
1 copie |
Note:Compte tenu du problème de la dégradation des acides nucléiques, les produits de la série ARN ne fournissent pas de modèles ni d'amorces de contrôle positif.
【Spécifications d'emballage】
- Spécifications : 48 T/paquet
【Kle stockage】
- Conditions de stockage : Conserver à -20 degrés avant ouverture de l'emballage.
- Durée de conservation : 14 mois.
【Note】
- Des amorces/sondes conçues automatiquement-doivent être ajoutées pour le développement du projet MIRA.
- Le kit est disponible en deux types - ADN et ARN. Le type d'ARN comprend la transcriptase inverse, permettant l'amplification avec l'ARN, l'ADNdb et l'ADNsb comme modèles. Le type d'ADN ne peut s'amplifier qu'avec l'ADNdb comme matrice.
- Disponible en trois types - Basic, Fluorescent et Test Strip. Choisissez le kit approprié en fonction de vos besoins et utilisez les amorces/sondes correspondantes.
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